1、体型：首先，分辨七彩神仙鱼的公母可以从体型入手。不过，幼鱼阶段一般是没办法分辨的，成年的七彩神仙鱼可以从体型判断。相比较之下，公鱼的体型比较大，而母鱼的体型会比较小。
2、外观：还可以从它们的外观来进行判断，有时候是比较明显的。首先是它们的额头，若是比较突出的话，则是公鱼；若是比较平滑，则是母鱼。还有它们的背鳍，公鱼的背鳍看起来是尖尖的，母鱼的则是圆圆的。还有它们的生殖器形状，母鱼的生殖器长度比较长，而且形状是管状的，公鱼的生殖器很小，是半圆的。
3、颜色：还可以通过它们的颜色来进行判断。跟其他的鱼类不一样，七彩神仙鱼母鱼的颜色比较现象，但公鱼的颜色比较暗淡，也就是跟其他鱼类正好相反。
4、繁殖期：另外，若是它们正好处于繁殖期的话，那么就比较容易了，可以看它们的行为以及腹部。腹部比较膨大的是母鱼，公鱼则会追逐母鱼。
七彩神仙鱼公母一般来说是可以在一块混养的，不会有什么危害，一般来说也不会打架。而且它们的习性特点是基本相同的，容易控制周围的环境因素。而且，在幼鱼阶段的时候，一般无法区分公母，只能公母放在一块混养。若是将成年的七彩神仙鱼公母一块混养的话，需要提供足够的食物，避免出现抢食的现象。
